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目的:探究miR-150、细胞周期蛋白B1(CCNB1)及线粒体融合蛋白2(MFN2)参与调控肝癌细胞Huh-7凋亡并抑制其侵袭迁移的机制.方法:将肝癌细胞Huh-7分为对照组(control组)、阴性对照组(NC组)和miR-150过表达组(mimic组),通过质粒转染构建miR-150过表达细胞系.CCK-8和流式细胞术应用于检测细胞活力的凋亡,细胞划痕实验和Transwell应用于检测迁移和侵袭,qPCR检测miRNA和mRNA水平,WB检测蛋白的相对表达水平.结果:miR-150可显著抑制Huh-7的细胞活力而促进凋亡(P<0.01).培养24 h后mimic组迁移率、侵袭率均显著低于control组和NC组(P<0.01).Mimic组的CCNB1蛋白和mRNA的表达水平显著低于control组和NC组(P<0.01),MFN2显著高于control组和NC组(P<0.01).结论:在肝癌细胞Huh-7中,miR-150可能通过下调CCNB1或上调M FN-2的水平抑制肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭,并促进其凋亡.

作者:文峰;向燕

来源:海南医学院学报 2019 年 25卷 9期

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作者:
文峰;向燕
来源:
海南医学院学报 2019 年 25卷 9期
标签:
肝癌 miR-150 细胞周期蛋白B1(CCNB1) 线粒体融合蛋白2(MFN2)
目的:探究miR-150、细胞周期蛋白B1(CCNB1)及线粒体融合蛋白2(MFN2)参与调控肝癌细胞Huh-7凋亡并抑制其侵袭迁移的机制.方法:将肝癌细胞Huh-7分为对照组(control组)、阴性对照组(NC组)和miR-150过表达组(mimic组),通过质粒转染构建miR-150过表达细胞系.CCK-8和流式细胞术应用于检测细胞活力的凋亡,细胞划痕实验和Transwell应用于检测迁移和侵袭,qPCR检测miRNA和mRNA水平,WB检测蛋白的相对表达水平.结果:miR-150可显著抑制Huh-7的细胞活力而促进凋亡(P<0.01).培养24 h后mimic组迁移率、侵袭率均显著低于control组和NC组(P<0.01).Mimic组的CCNB1蛋白和mRNA的表达水平显著低于control组和NC组(P<0.01),MFN2显著高于control组和NC组(P<0.01).结论:在肝癌细胞Huh-7中,miR-150可能通过下调CCNB1或上调M FN-2的水平抑制肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭,并促进其凋亡.