目的:通过顺铂(cisplatin,DDP)诱导卵巢癌细胞珠 SKOV3建立耐药细胞株 SKOV3/DDP,并研究其与凋亡途径蛋白的关系。方法应用倒置显微镜观察 DDP 对细胞形态的影响,四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测 DDP 对 SKOV3和 SKOV3/DDP 细胞的增殖抑制情况,流式细胞术(flow cytometry, FCM)检测细胞凋亡率以及细胞中 X链锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor-of-apoptosis protein,XIAP)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteine-aspartic acid protease-3,Caspase-3)、B 细胞淋巴瘤/白血病2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)和生存素(Survivin)的表达情况。结果 MTT法检测发现DDP作用后,SKOV3/DDP细胞的增殖抑制率较 SKOV3细胞显著降低(P<0.01),且存在着浓度和时间依赖效应(P<0.01)。由半数抑制浓度(50%concentration of inhibition,IC50)比较得 SKOV3/DDP 细胞24、48、72h 耐药指数(resistance index,RI)分别为2.434、2.950、3.780。FCM检测表明,DDP 作用后,SKOV3/DDP 凋亡率显著低于 SKOV3细胞(P<0.01)。与SKOV3细胞相比,SKOV3/DDP细胞中XIAP、Bcl-2、Survivin蛋白高表达,Caspase-3蛋白低表达,差异有统计学意义(P<0.01)。结论成功建
作者:申薇;梁冰锋;李秀荣;秦秀红;程建新
来源:河北医科大学学报 2014 年 10期