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目的 探讨 microRNA-32(miR-32)在骨肉瘤细胞增殖中的作用及机制.方法 应用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术检测骨肉瘤组织与正常组织及不同细胞株中miR-32的表达情况.采用CCK-8方法检测抑制 miR-32表达对人成骨肉瘤 MG-63细胞株增殖速率的影响.用荧光素酶实验检测 miR-32与人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)的3'-UTR特异性结合,采用 RT-PCR和蛋白质免疫印迹技术分别从 RNA 及蛋白质水平上验证 miR-32与PTEN的关系.结果 miR-32在骨肉瘤组织及细胞中通过与 PTEN 的3'-UTR靶向结合后激活了磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氛酸-苏氨酸蛋白激酶(phosphatidylinositol-3-kinase/serine-threonine kinase,PI3K/Akt)信号通路,进而影响人成骨肉瘤 MG-63细胞的增殖.结论 miR-32通过 PI3K/Akt信号通路调控骨肉瘤细胞的增殖.

作者:刘春杰;刘宇;邓学坤;王军童;张月明;张义庚

来源:河北医科大学学报 2018 年 39卷 6期

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作者:
刘春杰;刘宇;邓学坤;王军童;张月明;张义庚
来源:
河北医科大学学报 2018 年 39卷 6期
标签:
骨肉瘤 细胞增殖 微RNAs osteosarcoma cell proliferation microRNAs
目的 探讨 microRNA-32(miR-32)在骨肉瘤细胞增殖中的作用及机制.方法 应用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术检测骨肉瘤组织与正常组织及不同细胞株中miR-32的表达情况.采用CCK-8方法检测抑制 miR-32表达对人成骨肉瘤 MG-63细胞株增殖速率的影响.用荧光素酶实验检测 miR-32与人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)的3'-UTR特异性结合,采用 RT-PCR和蛋白质免疫印迹技术分别从 RNA 及蛋白质水平上验证 miR-32与PTEN的关系.结果 miR-32在骨肉瘤组织及细胞中通过与 PTEN 的3'-UTR靶向结合后激活了磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氛酸-苏氨酸蛋白激酶(phosphatidylinositol-3-kinase/serine-threonine kinase,PI3K/Akt)信号通路,进而影响人成骨肉瘤 MG-63细胞的增殖.结论 miR-32通过 PI3K/Akt信号通路调控骨肉瘤细胞的增殖.