目的:研究miR-219a-5p通过调控高迁移率蛋白A2(HMGA2)对骨肉瘤U2OS细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法:采用实时定量PCR检测骨肉瘤U2OS细胞和正常成骨细胞hFOB1.19的miR-219a-5p mRNA表达水平。采用脂质体转染法将miR-219a-5p模拟物miR-219a-5p mimic(miR-219a-5p mimic组)以及阴性对照mimic NC(mimic NC组)转染U2OS细胞,通过实时定量PCR检测转染后细胞miR-219a-5p和HMGA2 mRNA的表达水平,蛋白质印迹法检测HMGA2蛋白水平,采用CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖能力、划痕实验检测细胞迁移能力、Transwell小室侵袭实验检测细胞侵袭能力,利用双荧光素酶报告基因实验验证miR-219a-5p与HMGA2间的作用关系。结果:实时定量PCR结果显示,骨肉瘤U2OS细胞中的miR-219a-5p表达水平(0.11±0.01)显著低于正常成骨细胞(1.00±0.06),差异具有统计学意义(
t=26.83,
P<0.001)。CCK-8法结果显示,mimic NC组和miR-219a-5p mimic组培养24 h后细胞吸光度值分别为0.52±0.02、0.42±0.02,48 h后分别为0.85±0.03、0.60±0.03,72 h后分别为1.12±0.02、0.72±0.02,miR-219a-5p mimic组细胞增殖活性显著低于mimic NC组,差异均具有统计学意义(
t=6.97,
P<0.001;
t=16.65
作者:周仁邦;张仲传;许志远;朱勋兵
来源:国际肿瘤学杂志 2022 年 49卷 4期