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目的 探讨微小RNA-370(miR-370)靶向调控干扰素刺激基因15(ISG15)对喉癌细胞(LSC-1)增殖、迁移及侵袭的影响.方法 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测喉癌组织与癌旁组织中miR-370、ISG15 mRNA表达;体外培养LSC-1细胞,将其分为miR-370过表达(miR-370 mimics)组及其阴性对照(miR-NC)组、抑制ISG15表达(si-ISG15)组及其阴性对照(si-NC)组、miR-370 mimics+pcDNA组和miR-370 mimics+ISG15过表达(ISG15)组.双荧光素酶报告基因实验验证miR-370与ISG15的靶向关系;RT-qPCR法检测LSC-1细胞miR-370表达,细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测LSC-1细胞增殖活性;Transwell小室实验检测LSC-1细胞迁移与侵袭能力;免疫印迹法(Wester blotting,WB)检测LSC-1细胞ISG15、MMP-2、MMP-9蛋白表达.结果 喉癌组织中miR-370表达下调,ISG15 mRNA表达上调.数据库预测发现,miR-370与ISG15 mRNA 3'UTR区有结合位点,双荧光素酶实验显示miR-370与ISG15存在靶向关系;过表达miR-370或抑制ISG15表达,LSC-1细胞增殖、迁移与侵袭能力显著下降,MMP-2、MMP-9蛋白表达水平显著降低(P<0.05);过表达ISG15可部分逆转过表达miR-370对LSC-1细胞增殖、迁移与侵袭的抑制作用.结论 过表达miR-370可通过靶向抑制ISG15表达而抑制人喉癌细胞的增殖、迁移及侵袭.

作者:刘洋君;李丽;陆晓丹

来源:河北医药 2022 年 44卷 16期

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作者:
刘洋君;李丽;陆晓丹
来源:
河北医药 2022 年 44卷 16期
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微小RNA-370 干扰素刺激基因15 喉癌细胞 增殖 迁移 侵袭
目的 探讨微小RNA-370(miR-370)靶向调控干扰素刺激基因15(ISG15)对喉癌细胞(LSC-1)增殖、迁移及侵袭的影响.方法 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测喉癌组织与癌旁组织中miR-370、ISG15 mRNA表达;体外培养LSC-1细胞,将其分为miR-370过表达(miR-370 mimics)组及其阴性对照(miR-NC)组、抑制ISG15表达(si-ISG15)组及其阴性对照(si-NC)组、miR-370 mimics+pcDNA组和miR-370 mimics+ISG15过表达(ISG15)组.双荧光素酶报告基因实验验证miR-370与ISG15的靶向关系;RT-qPCR法检测LSC-1细胞miR-370表达,细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测LSC-1细胞增殖活性;Transwell小室实验检测LSC-1细胞迁移与侵袭能力;免疫印迹法(Wester blotting,WB)检测LSC-1细胞ISG15、MMP-2、MMP-9蛋白表达.结果 喉癌组织中miR-370表达下调,ISG15 mRNA表达上调.数据库预测发现,miR-370与ISG15 mRNA 3'UTR区有结合位点,双荧光素酶实验显示miR-370与ISG15存在靶向关系;过表达miR-370或抑制ISG15表达,LSC-1细胞增殖、迁移与侵袭能力显著下降,MMP-2、MMP-9蛋白表达水平显著降低(P<0.05);过表达ISG15可部分逆转过表达miR-370对LSC-1细胞增殖、迁移与侵袭的抑制作用.结论 过表达miR-370可通过靶向抑制ISG15表达而抑制人喉癌细胞的增殖、迁移及侵袭.