目的 探讨miR-181靶向调控线粒体融合基因Mfn1表达,对结肠癌细胞增殖的影响.方法 通过生物信息学预测,线粒体融合基因Mfn1为miR-181的特异性靶基因.实时定量PCR方法检测miR-181对Mfn1基因表达的影响,Western b1ot方法检测miR-181对Mfn1蛋白表达的影响.采用MTT法及流式细胞术检测转染miR-181对HCT116细胞增殖的影响.电镜技术观察转染miR-181对线粒体形态的影响、ATP检测试剂盒检测miR-181对结肠癌细胞线粒体功能的影响.结果 qRT-PCR及Wes-tern blot结果显示miR-181抑制了Mfn1的表达;转染miR-181后,HCT116细胞生长受到抑制,且发生了细胞周期G1/S期阻滞;miR-181过表达后,HCT116细胞的线粒体形态发生了改变,线粒体融合减少、裂变增多,且细胞ATP含量明显下降.结论 miR-181负性靶向调控Mfn1的表达、影响线粒体融合-分裂稳态,从而抑制结肠癌HCT-116细胞的增殖.
作者:王猛;刘正;陈瑛罡;王贵玉;王锡山
来源:哈尔滨医科大学学报 2015 年 49卷 3期