目的 研究miRNA-182及其靶蛋白成纤维生长因子9(FGF9)对肺动脉平滑肌细胞表型转换的调节作用.方法 体外培养大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC),用miRNA-182模拟体转染的方法使其过表达,FGF9siRNA转染使其沉默;使用CCK8方法检测细胞增殖能力,分别用RT-qPCR检测miRNA-182的表达,PCR方法检测FGF9及收缩型表型标记物(SMA,SM22α及myosin)的基因水平,Western blot 检测其蛋白水平.结果 过表达miRNA-182,收缩表型标记物SMA,SM22α及myosin基因表达水平明显升高,SMA蛋白表达量明显增加,转染miRNA-182抑制物之后,SMA蛋白表达量降低;另外,细胞相对吸光度降低,增殖被抑制,并且转染模拟体80 nmol/L较转染40 nmol/L吸光度更低;而转染miRNA-182抑制物之后,细胞相对吸光度明显增强,细胞增殖增加.过表达miR-182后,FGF9mRNA的表达明显降低,并且与模拟体的转染浓度直接相关.沉默FGF9表达之后SMA、SM22α和myosin表达增加,并抑制PASMC的增殖能力,同时沉默miR-182和FGF9表达之后,SMA、SM22α和myosin表达增高.结论 miRNA-182通过靶向抑制FGF9蛋白的表达,抑制PASMC收缩型向合成型转化,同时抑制其增殖能力.
作者：李广华；朱瑞冬；邓海龙；王秋实；徐广全
来源：哈尔滨医科大学学报 2017 年 51卷 5期
