目的：探讨Rho／Rock信号通路在TGF－β1刺激大鼠颈内动脉平滑肌细胞（ ISMC）表型转化中的作用及可能机制。方法 ISMC随机分为两组：空白对照组和TGF－β1刺激组，以不同浓度（1、5、10、20、50 ng／mL） TGF－β1刺激细胞24 h，用荧光实时定量PCR法检测转凝蛋白（ SM22α）和骨桥蛋白（ OPN） mRNA的表达；再以上述得出的最佳TGF－β1浓度刺激细胞，在不同时间（6、12、24、48 h）收集细胞，采用同样方法检测SM22α、OPN mRNA的表达水平；经无血清DMEM高糖培养基静止培养24 h后，随机分为以下各组：空白对照组、TGF－β1（10 ng／mL）刺激组及TGF－β1（10 ng／mL）＋法舒地尔（Fasudil）（10、30、50μmol／L）组，分别采用FQ－RT－PCR法检测SM22α、OPN、RhoA、Rock－1 mRNA的表达；Western blot法检测SM22α、OPN蛋白表达水平；根据实验结果用透射电镜观察各组细胞超微结构的相应变化。结果10 ng／mL TGF－β1刺激大鼠ISMCs 24 h达顶峰。 TGF－β1＋Fasudil组SM22αmRNA和蛋白表达水平较TGF－β1刺激组高（P＜0．01），且在Fasudil浓度为30μmol／L时达到高峰，随后下降；TGF－β1＋Fasudil组OPN mRNA表达水平较TGF－β1刺激组低，呈浓度依赖性，至30μmol／L达最低（ P＜0．05），后又呈上升趋势。
作者：曹飞鹏；黄树文；麦树荣
来源：广东医学 2016 年 37卷 15期
