目的 研究胚胎干细胞条件培养基是否可以抑制过氧化氢引起的心肌细胞凋亡及其潜在的作用机制.方法 收集培养小鼠胚胎干细胞24 h的培养液作为胚胎干细胞条件培养液,将大鼠乳鼠原代心肌细胞随机分为四组:空白对照组、H2O2(100 μmol/L)处理组、对照培养液组和胚胎干细胞条件培养液组,其中对照培养液组和胚胎干细胞条件培养液组分别在原代心肌细胞中加入胚胎干细胞培养基、胚胎干细胞条件培养基后,再用100 μmol/L H2O2处理4 h.通过MTT方法检测心肌细胞活力;通过细胞活性/毒性试剂盒检测心肌细胞存活情况;通过TUNEL凋亡试剂盒和电镜技术检测心肌细胞凋亡情况;通过激光共聚焦显微镜检测细胞内钙离子变化;通过Western blot法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Caspase3的表达情况.结果 MTT结果显示,与H2O2组相比,ES-CM组心肌细胞活力下降的现象明显得到抑制(P＜0.05).细胞活性/毒性试剂盒检测结果表明,与H2O2组相比,ES-CM组活细胞的百分数下降的现象明显得到抑制(P＜0.05).TUNEL凋亡试剂盒检测结果表明,与H2O2组相比,ES-CM组细胞凋亡百分数增加的现象明显得到抑制(P＜0.05).共聚焦显微镜检测的数据表明,与H2O2组相比,ES-CM组[Ca2+]i强度增加的现象明显得到抑制(P＜0.05).Western blot结果表明,与H2O2组相比,ES-CM组Bcl-2
作者：谢茹梦；李健楠；李果；袁野；任何群；张妍
来源：哈尔滨医科大学学报 2021 年 55卷 4期
