目的:观察转染有人端粒酶逆转录酶基因(human telomerase reverse transcriptase, hTERT)启动子调控的单纯疱疹病毒Ⅰ型胸苷激酶(herpes simplex virus thymidine kinase, HSV-tk)基因的人卵巢癌细胞的部分生物学特性.方法:构建hTERT启动子调控的HSV-tk基因重组逆转录病毒载体,筛选携带该载体的包装细胞,测定包装细胞产生的逆转录病毒滴度,并用病毒颗粒感染人卵巢癌SKOV3细胞(SKOV3/tk细胞)并经RT-PCR方法鉴定.然后倒置显微镜下观察SKOV3/tk细胞形态,MTT法研究细胞生长特性,并观察转染细胞裸鼠体内的成瘤能力.结果:包装细胞产生的病毒滴度可达2×103 cfu·ml-1.SKOV3/tk细胞扩增出770 bp 的tk基因片段,形态与SKOV3细胞无明显差异;倍增时间72 h,无明显变化;裸鼠体内的成瘤能力较SKOV3细胞下降.结论:hTERT调控的HSV-tk基因逆转录病毒载体构建成功;转染细胞的裸鼠体内成瘤能力降低.
作者：郭玉忠；姜国忠；李克虹；史惠蓉；王建民；薛乐勋
来源：郑州大学学报（医学版） 2004 年 39卷 4期
