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目的:探讨核干细胞因子(NS)特异性短发夹RNA(shRNA)沉默NS基因对白血病细胞HL-60分化的影响.方法:用体外合成的NS-shRNA转染HL-60细胞,Western blot检测转染细胞NS蛋白,Wright-Giemsa染色观察细胞形态学改变,流式细胞仪(FCM)测定细胞表面分化抗原变化,细胞髓过氧化物酶(MPO)和过碘酸-雪夫反应(PAS)测定细胞化学特征的变化.以转染无关shRNA序列的细胞作阴性对照,以未转染细胞作空白对照.结果:NS-shRNA转染的HL-60细胞NS蛋白较对照组降低;转染细胞细胞核和细胞质都出现了成熟和分化特征,分化抗原CD11b、CD33、CD14、CD64、HLA-DR增高,CD38降低,显示有向粒系继续成熟和向单核系重新分化的趋势;转染细胞内MPO活性增强,PAS反应增强.结论:阻断NS基因表达能促使HL-60细胞重分化.

作者:岳保红;朱晓燕;王清霞;刘帅;张功员;张秋堂;张慧;张钦宪

来源:郑州大学学报(医学版) 2007 年 42卷 4期

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岳保红;朱晓燕;王清霞;刘帅;张功员;张秋堂;张慧;张钦宪
来源:
郑州大学学报(医学版) 2007 年 42卷 4期
标签:
核干细胞因子 短发夹RNA 细胞分化 HL-60细胞
目的:探讨核干细胞因子(NS)特异性短发夹RNA(shRNA)沉默NS基因对白血病细胞HL-60分化的影响.方法:用体外合成的NS-shRNA转染HL-60细胞,Western blot检测转染细胞NS蛋白,Wright-Giemsa染色观察细胞形态学改变,流式细胞仪(FCM)测定细胞表面分化抗原变化,细胞髓过氧化物酶(MPO)和过碘酸-雪夫反应(PAS)测定细胞化学特征的变化.以转染无关shRNA序列的细胞作阴性对照,以未转染细胞作空白对照.结果:NS-shRNA转染的HL-60细胞NS蛋白较对照组降低;转染细胞细胞核和细胞质都出现了成熟和分化特征,分化抗原CD11b、CD33、CD14、CD64、HLA-DR增高,CD38降低,显示有向粒系继续成熟和向单核系重新分化的趋势;转染细胞内MPO活性增强,PAS反应增强.结论:阻断NS基因表达能促使HL-60细胞重分化.