目的:构建人胰岛素样生长因子-1(IGF-1)真核表达载体,并在人脐血神经干细胞(NSCs)中表达.方法:采用RT-PCR法从人胎肝中克隆IGF-1基因,将其导入真核表达载体pcDNA3.1中,用脂质体转染法将重组质粒转染人脐血NSCs.分别采用RT-PCR和免疫荧光细胞化学法检测转基因NSCs中IGF-1 mRNA和蛋白的表达.结果:琼脂糖电泳显示RT-PCR扩增出462 bp的条带;重组载体pcDNA3.1-IGF-1经Hind Ⅲ与BamHⅠ双酶切后,得到5 428 bp和462 bp的两个条带;目的基因转染的NSCs经RT-PCR扩增出一条与目的基因一致的条带;免疫荧光细胞化学检测到IGF-1蛋白的表达.结论:成功构建了人IGF-1基因的真核表达载体,转染后IGF-1重组蛋白在人脐血NSCs中能成功表达.
作者：朱登纳；王军；贾延劼；牛国辉；张博爱；吴值荣
来源：郑州大学学报（医学版） 2012 年 47卷 2期
