目的:构建含有人胰岛素样生长因子(human insulin-like growth factor-1,hIGF-1)前体编码全长cDNA的重组载体,使其在E.coli BL21(DE3)中表达,并对此表达菌株所表达的重组蛋白进行纯化,同时探讨其抗原性及应用价值.方法:采用PCR法,扩增编码hIGF-1前体cDNA的片段,通过双酶切、胶回收纯化、连接后得到pET32a(+)/hIGF-1重组载体,然后将其转化入BL21(DE3)中,经IPTG诱导后表达的重组蛋白经镍柱亲和层析纯化,并用Western blot法检测重组蛋白的抗原活性.结果:重组质粒pET32a(+)/hIGF-1经双酶切鉴定和测序分析后证实构建成功.BL21(DE3)表达的重组蛋白经SDS-PAGE电泳后显示,其表达量占细菌总蛋白量的25
作者：施有为；刘莉；程蕴琳
来源：南京医科大学学报(自然科学版) 2006 年 26卷 9期
