目的::探讨单细胞海藻(MPPT)提取物对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)的抗衰老作用。方法:取剖宫产新生儿脐带,分离、传代培养 hUC-MSCs,显微镜下观察细胞形态,收集第3、10、15代细胞,qRT-PCR 分析不同代细胞中 p16、p21、p53、PCNA、Sirt2 mRNA 的表达情况。 CCK-8法检测不同质量浓度 MPPT 提取物对第15代 hUC-MSCs 增殖的影响;流式细胞术检测 MPPT 提取物对 hUC-MSCs 细胞周期和凋亡的影响;β-半乳糖苷酶染色法检测MPPT 提取物对 hUC-MSCs 衰老的影响;qRT-PCR 检测 MPPT 提取物对 hUC-MSCs 中 p16、p21、p53、PCNA、Sirt2 mR-NA 表达的影响。结果:第3代细胞呈梭形贴壁细胞,第15代细胞呈不规则状态,易脱壁。随着传代次数的增加, hUC-MSCs 中 PCNA、Sirt2 mRNA 表达减少(F =76.944、25.649,P <0.001),而 p16、p21和 p53 mRNA 表达增加(F =46.714、77.645、845.676,P <0.001);与第15代细胞相比,1 g/ L 的 MPPT 提取物可促进第15代 hUC-MSCs 增殖,促进细胞周期进入 S 期,抑制细胞凋亡(P 均<0.05);MPPT 提取物处理组衰老细胞率降低(F =773.557,P <0.001),细胞中 PCNA、Sirt2 mRNA 表达增加,p16、p21和 p53 mRNA 表达降低(P 均<0.05)。结论:MPPT 提取物可能通过调节 hUC-MSCs 中 p16、p21、p53、PCNA
作者:姚宁;马珊珊;崔渊博;渠瑞娜;王欣欣;孟楠;宋及时;赵云;高军;关方霞
来源:郑州大学学报(医学版) 2015 年 4期