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目的:探讨沉默热休克蛋白70( HSP70)的表达对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响。方法:将体外培养的A549细胞分为空白对照组(仅加入转染试剂Lipofectamine 2000)、阴性对照组(转染无关序列)和干扰组(转染HSP70 siRNA)3组,采用流式细胞仪检测A549细胞凋亡率的变化,采用实时定量PCR法检测各组细胞中HSP70 mRNA表达的差异,采用Western blot 检测各组细胞中HSP70、p-JNK及Caspase-3蛋白表达的变化。结果:转染后24 h,干扰组A549细胞中HSP70 mRNA及蛋白表达明显受到抑制,与空白对照组和阴性对照组相比差异有统计学意义(F=150.348和450.953,P均<0.001);转染48 h后,干扰组细胞凋亡率高于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义(F=229.636,P<0.001)。与空白对照组和阴性对照组相比,干扰组A549细胞中p-JNK蛋白和Caspase-3蛋白表达明显受到抑制,差异有统计学意义(F=877.094和340.808,P均<0.001)。结论:沉默HSP70的表达可促进A549细胞的凋亡,且该过程伴随着p-JNK和Caspase-3表达水平的降低。

作者:阙菡雅;王小龙;李杰;徐小艳;夏艳秋;周舫

来源:郑州大学学报(医学版) 2015 年 5期

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作者:
阙菡雅;王小龙;李杰;徐小艳;夏艳秋;周舫
来源:
郑州大学学报(医学版) 2015 年 5期
标签:
肺癌 A549细胞 siRNA 热休克蛋白70 JNK 凋亡 lung cancer A549 cell siRNA heat shock protein 70 JNK apoptosis
目的:探讨沉默热休克蛋白70( HSP70)的表达对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响。方法:将体外培养的A549细胞分为空白对照组(仅加入转染试剂Lipofectamine 2000)、阴性对照组(转染无关序列)和干扰组(转染HSP70 siRNA)3组,采用流式细胞仪检测A549细胞凋亡率的变化,采用实时定量PCR法检测各组细胞中HSP70 mRNA表达的差异,采用Western blot 检测各组细胞中HSP70、p-JNK及Caspase-3蛋白表达的变化。结果:转染后24 h,干扰组A549细胞中HSP70 mRNA及蛋白表达明显受到抑制,与空白对照组和阴性对照组相比差异有统计学意义(F=150.348和450.953,P均<0.001);转染48 h后,干扰组细胞凋亡率高于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义(F=229.636,P<0.001)。与空白对照组和阴性对照组相比,干扰组A549细胞中p-JNK蛋白和Caspase-3蛋白表达明显受到抑制,差异有统计学意义(F=877.094和340.808,P均<0.001)。结论:沉默HSP70的表达可促进A549细胞的凋亡,且该过程伴随着p-JNK和Caspase-3表达水平的降低。