目的:利用慢病毒(LV)介导的 RNA 干扰下调老龄人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)中 p16基因的表达,研究 p16表达下调与 hUC-MSCs 衰老的关系。方法:实验分为第3代(P3)hUC-MSCs 组(P3组)、P15 hUC-MSCs组(P15组)、LV-sip16感染 P15 hUC-MSCs 组(LV-sip16组)和 LV-NC 感染 P15 hUC-MSCs 组(空病毒组)。采用CCK-8法检测细胞增殖,β-半乳糖苷酶染色计算衰老细胞率,流式细胞术检测细胞周期及凋亡,qRT-PCR 检测衰老相关基因 p16、p21、p53、pCNA、sirt1、sirt2、CyclinD1、CDK4 mRNA 的表达。结果:LV-sip16感染能促进 P15 hUC-MSCs 增殖,降低衰老细胞率,促使细胞周期进入 S 期,抑制 hUC-MSCs 的早期凋亡(P 均<0.05);同时,LV-sip16组细胞中 p16、p21、p53 mRNA 表达量较 P15组降低,而 pCNA、sirt1、sirt2、CyclinD1、CDK4 mRNA 表达量升高(P 均<0.05)。结论:下调 P15 hUC-MSCs 中 p16基因的表达能够延缓和改善 hUC-MSCs 的衰老。
作者:韩康;马珊珊;朱相展;孟楠;王欣欣;邢衢;黄团结;韩莉;石振庆;杨波;关方霞
来源:郑州大学学报(医学版) 2016 年 51卷 4期