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目的:探讨下调Ets2表达对裸鼠Eca109移植瘤生长及mTOR/p70S6K信号通路的影响。方法:选择已筛选出的在体外靶向下调Ets2基因表达的siRNA片段,构建包含此片段的慢病毒(LV-siEts2)并感染Eca109,15只裸鼠随机分为空白对照组、阴性对照组和LV-siEts2组,分别背部皮下接种Eca109、LV感染的Eca109和LV-siEts2感染的Eca109,形成移植瘤,之后观察肿瘤生长情况、绘制肿瘤生长曲线并计算肿瘤抑制率。应用qRT-PCR检测肿瘤组织中Ets2 mRNA的表达,TUNEL法检测肿瘤组织细胞的凋亡,Western blot法检测肿瘤组织中Ets2、Caspase-3、Bcl-2、E-cadherin以及mTOR/p70S6K信号通路蛋白的表达。结果:LV-siEts2组肿瘤生长速度明显变慢,肿瘤体积和质量显著小于空白对照组和阴性对照组(P<0.05);LV-siEts2组肿瘤组织中Ets2 mRNA及蛋白表达水平均显著降低;LV-siEts2能引起Eca109细胞的凋亡,且上调Caspase-3和E-cadherin蛋白表达水平,而下调Bcl-2蛋白表达水平(P<0.05);LV-siEts2能显著降低mTOR及p70S6K的蛋白表达。结论:LV-siEts2在体内通过抑制mTOR/p70S6K信号通路促进细胞凋亡,从而抑制裸鼠Eca109移植瘤的生长。

作者:韩康;马珊珊;李庆华;王欣欣;朱相展;孟楠;韩莉;关方霞

来源:郑州大学学报(医学版) 2016 年 51卷 6期

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韩康;马珊珊;李庆华;王欣欣;朱相展;孟楠;韩莉;关方霞
来源:
郑州大学学报(医学版) 2016 年 51卷 6期
标签:
Ets2 siRNA Eca109 裸鼠 凋亡 mTOR/p70S6K信号通路 Ets2 siRNA Eca109 nude mice apoptosis mTOR/p70S6K signaling pathway
目的:探讨下调Ets2表达对裸鼠Eca109移植瘤生长及mTOR/p70S6K信号通路的影响。方法:选择已筛选出的在体外靶向下调Ets2基因表达的siRNA片段,构建包含此片段的慢病毒(LV-siEts2)并感染Eca109,15只裸鼠随机分为空白对照组、阴性对照组和LV-siEts2组,分别背部皮下接种Eca109、LV感染的Eca109和LV-siEts2感染的Eca109,形成移植瘤,之后观察肿瘤生长情况、绘制肿瘤生长曲线并计算肿瘤抑制率。应用qRT-PCR检测肿瘤组织中Ets2 mRNA的表达,TUNEL法检测肿瘤组织细胞的凋亡,Western blot法检测肿瘤组织中Ets2、Caspase-3、Bcl-2、E-cadherin以及mTOR/p70S6K信号通路蛋白的表达。结果:LV-siEts2组肿瘤生长速度明显变慢,肿瘤体积和质量显著小于空白对照组和阴性对照组(P<0.05);LV-siEts2组肿瘤组织中Ets2 mRNA及蛋白表达水平均显著降低;LV-siEts2能引起Eca109细胞的凋亡,且上调Caspase-3和E-cadherin蛋白表达水平,而下调Bcl-2蛋白表达水平(P<0.05);LV-siEts2能显著降低mTOR及p70S6K的蛋白表达。结论:LV-siEts2在体内通过抑制mTOR/p70S6K信号通路促进细胞凋亡,从而抑制裸鼠Eca109移植瘤的生长。