目的:运用差异显示技术初步筛选肾虚型支气管哮喘的相关基因,为探讨肾虚证的相关基因表达谱打下基础.方法:用限制性酶切片段差异显示技术(RFDD-PCR),收集支气管哮喘肾虚证患者治疗前后外周血,分离纯化其总RNA、合成双链cDNA、TaqI限切酶酶切、在酶切位点两端连上接头、用特异配对于接头的引物进行降落PCR扩增、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染、回收差异条带并重扩增、反向斑点杂交、测序、生物信息学分析.结果:共找到三十六条差异条带,其中二十五条能用斑点杂交验证,选取共性差异条带三条进行测序,结果与基因库比较未发现同源序列.结论:三条基因片段可能是与支气管哮喘肾虚证相关的新基因.
作者：胡岳山；李杰芬；王斌
来源：河南中医学院学报 2005 年 20卷 3期
