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目的:ISG15是干扰素刺激基因15的表达产物,它与肿瘤发生密切相关但具体机制尚未明确.本研究拟构建ISG15的真核表达载体,为进一步研究其参与肿瘤发生调控的具体机制提供工具.方法:从人源白血病细胞(KT1/A3)抽提总RNA并逆转录成cDNA,PCR扩增后产物与穿梭载体PCDNA3.1(+)进行限制性双酶切、连接、转化及测序验证.结果:与NCBI公布的isg15序列比对,我们成功的构建了PCDNA3.1(+)-ISG15载体.结论:ISG15真核载体的构建为研究ISG15在肿瘤中的作用机制奠定了基础.

作者:万新星;陈汉春

来源:湖南师范大学学报(医学版) 2020 年 17卷 4期

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作者:
万新星;陈汉春
来源:
湖南师范大学学报(医学版) 2020 年 17卷 4期
标签:
ISG15 肿瘤 泛素 真核表达载体
目的:ISG15是干扰素刺激基因15的表达产物,它与肿瘤发生密切相关但具体机制尚未明确.本研究拟构建ISG15的真核表达载体,为进一步研究其参与肿瘤发生调控的具体机制提供工具.方法:从人源白血病细胞(KT1/A3)抽提总RNA并逆转录成cDNA,PCR扩增后产物与穿梭载体PCDNA3.1(+)进行限制性双酶切、连接、转化及测序验证.结果:与NCBI公布的isg15序列比对,我们成功的构建了PCDNA3.1(+)-ISG15载体.结论:ISG15真核载体的构建为研究ISG15在肿瘤中的作用机制奠定了基础.