目的:阐明HSP70对H2O2所致C2C12肌原细胞凋亡的影响及其作用机制.方法:采用基因瞬间转染技术使细胞HSP70或/和Smac高表达,采用Hoechst 33258染色观察H2O2 (0.5mmol/L)处理转基因C2C12肌原细胞不同时间后细胞核形态学改变并计算凋亡核百分率.DNA抽提及琼脂糖电泳观察凋亡特征性梯带.采用caspase活性定量检测试剂盒及蛋白质印迹分析caspase-9和caspase-3的活化.利用免疫荧光分析HSP70对H2O2所致Smac从线粒体释放的影响.结果:HSP70对H2O2及Smac所致C2C12肌原细胞凋亡具有明显的抑制作用,凋亡核百分率明显降低, DNA电泳未出现明显"梯状"条带;caspase-9和caspase-3的活化明显受到抑制;并进一步发现HSP70可抑制H2O2所致C2C12肌原细胞Smac从线粒体释放.结论:HSP70可通过抑制Smac从线粒体释放来抑制H2O2所致C2C12肌原细胞凋亡.
作者：蒋碧梅；肖卫民；石永忠；刘梅冬；肖献忠
来源：中南大学学报（医学版） 2005 年 30卷 1期
