目的:探讨氧化应激对热休克蛋白70(heat shock protein 70, HSP70)核仁分布的影响.方法:采用热休克反应(42 ℃ 1 h,37 ℃恢复12 h)诱导C2C12细胞中HSP70的高表达;构建HSP70与增强绿色荧光蛋白(EGFP)的重组质粒.将重组质粒瞬时转染C2C12肌原细胞后,用免疫印迹技术分别检测热休克反应及基因转染诱导的HSP70表达;在分离纯化核仁和胞质蛋白组分后,分别采用免疫细胞化学、荧光技术及免疫印迹检测氧化应激(0.5 mmol/L H2O2)诱导的HSP70的分布改变.结果:免疫印迹显示,热休克反应和瞬时转染重组质粒,均能导致C2C12细胞中HSP70的高表达;荧光示踪显示,过氧化氢处理1 h后,可见胞核有较强的荧光;免疫细胞化学及细胞组分蛋白质免疫印迹显示,热休克处理的细胞暴露于过氧化氢1 h后,HSP70从细胞质向细胞核及核仁移位.结论: 氧化应激能导致HSP70从胞质向核仁移位.
作者:涂自智;王慷慨;邹江;刘可;邓恭华;肖献忠
来源:中南大学学报(医学版) 2005 年 30卷 4期