目的:探讨RelB基因沉默的髓源树突状细胞(BMDC)负载电鳗乙酰胆碱受体(TAChR)优势肽段Tα_(146~162)在TAChR预致敏C57BL/6小鼠中能否诱导免疫耐受.方法:制备产生RelB siRNA分子的重组慢病毒和对照病毒.慢病毒感染BMDC后,给予LPS刺激,相应的DC命名为DC-siRelB和DC-control.应用实时定量PCR和Western印迹分析细胞中RelB表达,流式细胞仪检测细胞表型,ELISA检测上清白细胞介素(IL)-12水平.36只C57BL/6小鼠随机分为A1,A2,A3,K1,K2,K3共6组.实验前1天,A1~A3组用TAChR+完全福氏佐剂(CFA)致敏;K1~K3组用钥孔戚血清蛋白(KLH)+CFA致敏.第7天,A2和K2组注射Tα_(146~162)脉冲的DC-siRelB;A3和K3组注射Tα_(146~162)脉冲的DC-control;A1和K1组给予PBS.第14天,~3H-TdR掺入法检测淋巴细胞增殖反应.结果:成功构建了含RelBshRNA基因的重组慢病毒,RelB~(siRNA)可显著下调DC中RelB的表达.与DC-control相比,DC-siRelB中CD80,CD86,MHCII表达及IL-12水平显著降低.与A1和A3组相比,A2组TAChR刺激下淋巴细胞增殖反应显著降低(P<0.05),ConA和KLH刺激下淋巴细胞增殖反应差异无统计学意义(P>0.05).K1,K2和K3组在KLH刺激下淋巴细胞增殖反应差异均无统计学意义(P>0.05).结论:慢病毒介导的RelB基因沉默的BMDC可抵制成熟诱导反应并能
作者:张勇;杨欢;肖波;鲁特飞
来源:中南大学学报(医学版) 2010 年 35卷 1期