目的:用基因工程手段获得有活性的抗独特型抗体I50,并在体外鉴定其活性.方法:以fuse5-I50为模板,用PCR方法扩增出抗独特型抗体I50基因,并将其插入到pET25b(+)中构建原核表达载体pET25b-I50.含有重组质粒pET25b-I50的菌株E.coli BL21(DE3)经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导能够得到有效表达.采用Western印迹鉴定I50蛋白的表达,采用透析复性方法恢复I50蛋白的活性,并用Dot-ELISA法,淋巴细胞增殖实验鉴定其活性.结果:成功的构建了原核表达载体pET25b-I50,并经IPTG诱导获得了I50 蛋白,该蛋白以包涵体形式高效表达,经纯化后纯度达90
作者：王甲甲；李亚林；郭锋杰；周国华；李官成
来源：中南大学学报（医学版） 2011 年 36卷 3期
