目的构建和表达日本血吸虫单克隆抗抗独特型抗体NP48单特异性双链抗体,并初步鉴定表达产物活性.方法应用SOE法扩增双链抗体基因VH-linker-VL(Diabody,简称D).将D重组入原核表达载体pBAD/gⅢ.表达质粒转化E.coli TOP10,左旋阿拉伯糖诱导表达.对D的表达产物进行分离纯化,采用Dot-ELISA法检测纯化蛋白与NP30、可溶性虫卵抗原(SEA)、可溶性成虫抗原(SWAP)的结合活性.结果测序证实双链抗体基因D构建成功;构建了D的原核表达系统,诱导表达产物主要以包涵体形式存在,分子量约为27 kD;经纯化、变性复性后用Dot-ELISA法鉴定结果表明,D表达的纯化蛋白可与NP30特异性结合.结论所构建、表达的NP48单特异性双链抗体具有亲本单抗的部分特性.
作者：朱毅；朱进；冯振卿；徐璐；李芸茜；仇镇宁；管晓虹
来源：中国血吸虫病防治杂志 2005 年 17卷 4期
