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目的:研究钙离子载体(calcium ionophore,CI)A23187联合γ-干扰素(IFN-γ)诱导健康人外周血单个核细胞(PBMNC)生成树突状细胞(DC),探索DC扩增的新方法.方法:分离健康人PBMNC,分别加入GM-CSF +IL-4,A23187,A23187+IFN-γ.体外培养72h后,分别于光镜、电镜下观察细胞的形态,流式细胞仪检测细胞表面标志,MTT比色法检测其对同种异体T细胞的刺激增殖作用,ELISA检测IL-12和IFN-γ的水平.结果:健康人PBMNC在A23187+IFN-γ的条件下培养72h后,与GM-CSF +IL-4组,A23187组比较,能迅速获得典型的树突状细胞形态;CD40,CD83,CD86分子的表达较均明显升高(P<0.01),但CD1a分子的表达明显下降(P<0.01);具有明显刺激同种异体T细胞增殖的能力;IL-12,IFN-γ的水平比其他组明显增高(P<0.01).结论:A23187联合IFN-γ诱导健康人PBMNC能更快速、有效地诱导生成成熟的DC.

作者:孟娟;彭大为;左学兰

来源:中南大学学报(医学版) 2012 年 37卷 10期

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作者:
孟娟;彭大为;左学兰
来源:
中南大学学报(医学版) 2012 年 37卷 10期
标签:
钙离子载体 γ-干扰素 树突状细胞 外周血单个核细胞
目的:研究钙离子载体(calcium ionophore,CI)A23187联合γ-干扰素(IFN-γ)诱导健康人外周血单个核细胞(PBMNC)生成树突状细胞(DC),探索DC扩增的新方法.方法:分离健康人PBMNC,分别加入GM-CSF +IL-4,A23187,A23187+IFN-γ.体外培养72h后,分别于光镜、电镜下观察细胞的形态,流式细胞仪检测细胞表面标志,MTT比色法检测其对同种异体T细胞的刺激增殖作用,ELISA检测IL-12和IFN-γ的水平.结果:健康人PBMNC在A23187+IFN-γ的条件下培养72h后,与GM-CSF +IL-4组,A23187组比较,能迅速获得典型的树突状细胞形态;CD40,CD83,CD86分子的表达较均明显升高(P<0.01),但CD1a分子的表达明显下降(P<0.01);具有明显刺激同种异体T细胞增殖的能力;IL-12,IFN-γ的水平比其他组明显增高(P<0.01).结论:A23187联合IFN-γ诱导健康人PBMNC能更快速、有效地诱导生成成熟的DC.