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目的 获得高表达人铜锌超氧化物歧化酶(hCu/Zn-SOD)的工程菌.方法 采用RT-PCR技术从人胃组织总RNA中分离扩增了hCu/Zn-SOD的cDNA序列,将该基因重组到T7启动子控制下的分泌型表达载体pET22b(+)中,构建了表达质粒pETSOD,并转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达.采用SDS-PAGE、蛋白质免疫印迹分析其活性.结果 该工程菌可高表达一相对分子质量大约16kD的蛋白,与抗人Cu/Zn-SOD多克隆抗体有特异的免疫反应,表达量可达菌体可溶性蛋白的20

作者:李雪莲;武峰;史兆兴

来源:医药论坛杂志 2006 年 27卷 16期

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作者:
李雪莲;武峰;史兆兴
来源:
医药论坛杂志 2006 年 27卷 16期
标签:
铜锌超氧化物歧化酶 分泌表达 大肠杆菌
目的 获得高表达人铜锌超氧化物歧化酶(hCu/Zn-SOD)的工程菌.方法 采用RT-PCR技术从人胃组织总RNA中分离扩增了hCu/Zn-SOD的cDNA序列,将该基因重组到T7启动子控制下的分泌型表达载体pET22b(+)中,构建了表达质粒pETSOD,并转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达.采用SDS-PAGE、蛋白质免疫印迹分析其活性.结果 该工程菌可高表达一相对分子质量大约16kD的蛋白,与抗人Cu/Zn-SOD多克隆抗体有特异的免疫反应,表达量可达菌体可溶性蛋白的20