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目的 获取灰毡毛忍冬不同器官总RNA的最佳提取方法. 方法 以灰毡毛忍冬叶、茎、花蕾为材料,分别采用SDS法、Trizol法、改良CTAB法、多糖多酚试剂盒法提取总RNA,比较分析实验结果. 结果 SDS法不适用于三种器官样品总RNA的提取;Trizol法仅适用于叶总RNA的提取; 改良CTAB法对茎总RNA提取效果最佳; 而多糖多酚试剂盒法提取的花蕾总RNA质量高、 完整性较好, 且通过RT-PCR扩增能获得特异性条带. 结论 Trizol法最适于灰毡毛忍冬叶总RNA提取; 改良CTAB法最适于茎总RNA提取;多糖多酚试剂盒法最适于花蕾总RNA提取;3种方法提取出来的总RNA均能满足灰毡毛忍冬中相关基因全长克隆及时空表达分析的要求.

作者:刘湘丹;徐玉琴;王珊;童巧珍;周日宝

来源:湖南中医药大学学报 2015 年 35卷 12期

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作者:
刘湘丹;徐玉琴;王珊;童巧珍;周日宝
来源:
湖南中医药大学学报 2015 年 35卷 12期
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灰毡毛忍冬 基因全长克隆 总RNA 不同器官 提取方法 Lonicera macranthoides Hand.-Mazz. full-length gene cloning total RNA different organs extraction method
目的 获取灰毡毛忍冬不同器官总RNA的最佳提取方法. 方法 以灰毡毛忍冬叶、茎、花蕾为材料,分别采用SDS法、Trizol法、改良CTAB法、多糖多酚试剂盒法提取总RNA,比较分析实验结果. 结果 SDS法不适用于三种器官样品总RNA的提取;Trizol法仅适用于叶总RNA的提取; 改良CTAB法对茎总RNA提取效果最佳; 而多糖多酚试剂盒法提取的花蕾总RNA质量高、 完整性较好, 且通过RT-PCR扩增能获得特异性条带. 结论 Trizol法最适于灰毡毛忍冬叶总RNA提取; 改良CTAB法最适于茎总RNA提取;多糖多酚试剂盒法最适于花蕾总RNA提取;3种方法提取出来的总RNA均能满足灰毡毛忍冬中相关基因全长克隆及时空表达分析的要求.