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目的 探讨地乌三萜皂苷类成分W1对体外破骨细胞分化及骨吸收功能的影响.方法 3个不同浓度(0.0625,0.125,0.25 μg/ml)的W1与核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kB ligand,RANKL)诱导的小鼠单核/巨噬细胞RAW 264.7共孵育7天,抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色观察TRAP阳性多核细胞的形成,甲苯胺蓝染色及扫描电镜观察骨吸收陷窝的形成,图像分析计算骨吸收陷窝面积百分比;同3个浓度的W1与RANKL诱导的RAW264.7细胞共孵育24小时后收集细胞上清液,放射免疫法检测肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的含量;甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测W1对RAW264.7细胞毒性影响.结果 RANKL组诱导RAW 264.7细胞形成多量TRAP阳性多核细胞,形成明显的骨吸收陷窝,并诱导TNF-α在RAW264.7细胞上清中异常高表达;与RANKL组相比,3个浓度的W1均能显著减少TRAP阳性细胞数(P<0.01),显著减少骨吸收陷窝面积(P<0.01,P<0.001,P<0.001),明显降低TNF-α的表达量(P <0.05,P<0.01,P<0.01),且未观察到对RAW264.7的细胞毒性.结论 W1对由RANKL诱导的体外破骨细胞分化和骨吸收功能有一定的负调节作用.

作者:杨悦;孔祥英;万红叶;苏晓慧;林娜

来源:环球中医药 2014 年 7卷 3期

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作者:
杨悦;孔祥英;万红叶;苏晓慧;林娜
来源:
环球中医药 2014 年 7卷 3期
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地乌三萜皂苷W1 小鼠单核/巨噬细胞RAW264.7 肿瘤坏死因子α 骨吸收 Triterpene saponin W1 from rhizome of Anemone Flaccid RAW264.7 Tumor necrosis factor-α Bone resoroption
目的 探讨地乌三萜皂苷类成分W1对体外破骨细胞分化及骨吸收功能的影响.方法 3个不同浓度(0.0625,0.125,0.25 μg/ml)的W1与核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kB ligand,RANKL)诱导的小鼠单核/巨噬细胞RAW 264.7共孵育7天,抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色观察TRAP阳性多核细胞的形成,甲苯胺蓝染色及扫描电镜观察骨吸收陷窝的形成,图像分析计算骨吸收陷窝面积百分比;同3个浓度的W1与RANKL诱导的RAW264.7细胞共孵育24小时后收集细胞上清液,放射免疫法检测肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的含量;甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测W1对RAW264.7细胞毒性影响.结果 RANKL组诱导RAW 264.7细胞形成多量TRAP阳性多核细胞,形成明显的骨吸收陷窝,并诱导TNF-α在RAW264.7细胞上清中异常高表达;与RANKL组相比,3个浓度的W1均能显著减少TRAP阳性细胞数(P<0.01),显著减少骨吸收陷窝面积(P<0.01,P<0.001,P<0.001),明显降低TNF-α的表达量(P <0.05,P<0.01,P<0.01),且未观察到对RAW264.7的细胞毒性.结论 W1对由RANKL诱导的体外破骨细胞分化和骨吸收功能有一定的负调节作用.