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目的:构建TRF2小干扰RNA载体,观察其在胃癌细胞中的表达.方法:根据pSilencer3.1-H1载体要求设计两对小干扰RNA,退火后连接入载体相应位点.经双酶切及测序鉴定后分别转染多药耐药衍生胃癌细胞SGC7901/ADR和SGC7901/VCR.G418选择培养液培养2 mo选取转染组及对照组细胞克隆.MTT法检测转染对细胞生长增殖速度的影响.细胞用阿霉素和足叶乙甙处理6 h后Western blot法检测TRF2表达.结果:成功构建TRF2小干扰RNA载体,建立稳定转染细胞株,转染后TRF2表达明显降低,对细胞的生长增殖速度无明显影响(P>0.05).结论:成功构建TRF2小干扰RNA载体及稳定转染细胞株.

作者:宁寒冰;李继昌;刘志国;樊代明

来源:世界华人消化杂志 2006 年 14卷 11期

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作者:
宁寒冰;李继昌;刘志国;樊代明
来源:
世界华人消化杂志 2006 年 14卷 11期
标签:
端粒重复序列结合因子2 胃癌 小干扰RNA
目的:构建TRF2小干扰RNA载体,观察其在胃癌细胞中的表达.方法:根据pSilencer3.1-H1载体要求设计两对小干扰RNA,退火后连接入载体相应位点.经双酶切及测序鉴定后分别转染多药耐药衍生胃癌细胞SGC7901/ADR和SGC7901/VCR.G418选择培养液培养2 mo选取转染组及对照组细胞克隆.MTT法检测转染对细胞生长增殖速度的影响.细胞用阿霉素和足叶乙甙处理6 h后Western blot法检测TRF2表达.结果:成功构建TRF2小干扰RNA载体,建立稳定转染细胞株,转染后TRF2表达明显降低,对细胞的生长增殖速度无明显影响(P>0.05).结论:成功构建TRF2小干扰RNA载体及稳定转染细胞株.