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目的:应用2-乙酰氨基芴(2-acetaminofluorene,2-AAF),研究L02细胞移植到具有正常免疫性的大鼠肝内的存活与增殖情况.方法:SD大鼠出生前宫内ip正常人L02肝细胞,诱导胎鼠对L02肝细胞产生免疫耐受,出生2 wk时分别ip小(1.2 mg/kg)、中(13 mg/kg)、大剂量(30 mg/kg)2-乙酰氨基芴或生理盐水,隔日行2/3肝切除术,同时经脾移植DiI染色后的人L02肝细胞,建立2-AAF/PH肝细胞增殖模型.采用免疫荧光、RT-PCR、免疫组化、DiI荧光示踪等方法,在不同时相分别检测人白蛋白、人白蛋白mRNA、增殖细胞核抗原(PCNA)以及在荧光显微镜下观察人L02肝细胞在鼠肝内的分布,并采用计算机图像分析系统分析不同时相PCNA阳性细胞的数密度和面积密度.结果:2-乙酰氨基芴实验组(小、中、大剂量)的各项检测,均与对照组无明显区别;于移植后1,2,4,6,8,10 wk在荧光显微镜下观察到人L02肝细胞在鼠肝内的动态分布;移植后2,4,6,8 wk大鼠均检测出人白蛋白及人白蛋白mRNA;移植后2,4,6 wk检测出特异性人增殖细胞核抗原PCNA,移植后1,2,4,6,8 wk检测出非特异性PCNA.结论:2-AAF/PH模型中,2-乙酰氨基芴对移植L02细胞无明显增殖作用;L02细胞在2-乙酰氨基芴处理人鼠嵌合肝动物模型中存活10 wk,产生白蛋白功能持续8 wk.

作者:林沪;毛青;王宇明;蒋业贵;邓国宏;蒋黎;李俊刚;刘国栋

来源:世界华人消化杂志 2006 年 14卷 23期

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作者:
林沪;毛青;王宇明;蒋业贵;邓国宏;蒋黎;李俊刚;刘国栋
来源:
世界华人消化杂志 2006 年 14卷 23期
标签:
嵌合肝 L02肝细胞 动物模型 移植 大鼠
目的:应用2-乙酰氨基芴(2-acetaminofluorene,2-AAF),研究L02细胞移植到具有正常免疫性的大鼠肝内的存活与增殖情况.方法:SD大鼠出生前宫内ip正常人L02肝细胞,诱导胎鼠对L02肝细胞产生免疫耐受,出生2 wk时分别ip小(1.2 mg/kg)、中(13 mg/kg)、大剂量(30 mg/kg)2-乙酰氨基芴或生理盐水,隔日行2/3肝切除术,同时经脾移植DiI染色后的人L02肝细胞,建立2-AAF/PH肝细胞增殖模型.采用免疫荧光、RT-PCR、免疫组化、DiI荧光示踪等方法,在不同时相分别检测人白蛋白、人白蛋白mRNA、增殖细胞核抗原(PCNA)以及在荧光显微镜下观察人L02肝细胞在鼠肝内的分布,并采用计算机图像分析系统分析不同时相PCNA阳性细胞的数密度和面积密度.结果:2-乙酰氨基芴实验组(小、中、大剂量)的各项检测,均与对照组无明显区别;于移植后1,2,4,6,8,10 wk在荧光显微镜下观察到人L02肝细胞在鼠肝内的动态分布;移植后2,4,6,8 wk大鼠均检测出人白蛋白及人白蛋白mRNA;移植后2,4,6 wk检测出特异性人增殖细胞核抗原PCNA,移植后1,2,4,6,8 wk检测出非特异性PCNA.结论:2-AAF/PH模型中,2-乙酰氨基芴对移植L02细胞无明显增殖作用;L02细胞在2-乙酰氨基芴处理人鼠嵌合肝动物模型中存活10 wk,产生白蛋白功能持续8 wk.