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目的:应用倒千里光碱(retrorsine,Rts),研究正常人L02肝细胞移植到具有正常免疫活性的大鼠肝内的存活与增殖情况.方法:SD大鼠出生前宫内ip人L02肝细胞,诱导胎鼠对人L02肝细胞产生免疫耐受,出生3 wk后分别ip Rts或生理盐水,再经脾移植DiI(1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine perchlorate)染色后的人L02肝细胞,建立人鼠嵌合肝动物模型.采用免疫荧光、逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RTPCR)、免疫组化、DiI荧光示踪等方法,在不同时相分别检测人白蛋白、人白蛋白mRNA、特异性人增殖细胞核抗原(PCNA)以及在荧光显微镜下观察人L02肝细胞在鼠肝内的分布,并采用计算机图像分析系统分析不同时相PCNA阳性细胞的数密度和面积密度.结果:实验组于移植后1 wk-6 mo,在荧光显微镜下观察到人L02肝细胞在鼠肝内的动态分布,而对照组为移植后1-10 wk;实验组移植后2 wk-6 mo,大鼠检测出人白蛋白、人白蛋白mRNA及特异性人增殖细胞核抗原PCNA,而对照组分别于移植后2-8 wk检测出白蛋白及人白蛋白mRNA,移植后2 wk-6 mo检测出特异性人PCNA.以上各组阳性细胞的出现均以移植4 wk最多.PCNA阳性细胞的数密度和面积密度均显示,特异性人PCNA组与其对照组比较有统计学差异(P<0

作者:林沪;毛青;王宇明;蒋业贵;蒋黎

来源:世界华人消化杂志 2007 年 15卷 4期

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作者:
林沪;毛青;王宇明;蒋业贵;蒋黎
来源:
世界华人消化杂志 2007 年 15卷 4期
标签:
肝细胞 嵌合肝 移植 大鼠 增殖 倒千里光碱
目的:应用倒千里光碱(retrorsine,Rts),研究正常人L02肝细胞移植到具有正常免疫活性的大鼠肝内的存活与增殖情况.方法:SD大鼠出生前宫内ip人L02肝细胞,诱导胎鼠对人L02肝细胞产生免疫耐受,出生3 wk后分别ip Rts或生理盐水,再经脾移植DiI(1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine perchlorate)染色后的人L02肝细胞,建立人鼠嵌合肝动物模型.采用免疫荧光、逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RTPCR)、免疫组化、DiI荧光示踪等方法,在不同时相分别检测人白蛋白、人白蛋白mRNA、特异性人增殖细胞核抗原(PCNA)以及在荧光显微镜下观察人L02肝细胞在鼠肝内的分布,并采用计算机图像分析系统分析不同时相PCNA阳性细胞的数密度和面积密度.结果:实验组于移植后1 wk-6 mo,在荧光显微镜下观察到人L02肝细胞在鼠肝内的动态分布,而对照组为移植后1-10 wk;实验组移植后2 wk-6 mo,大鼠检测出人白蛋白、人白蛋白mRNA及特异性人增殖细胞核抗原PCNA,而对照组分别于移植后2-8 wk检测出白蛋白及人白蛋白mRNA,移植后2 wk-6 mo检测出特异性人PCNA.以上各组阳性细胞的出现均以移植4 wk最多.PCNA阳性细胞的数密度和面积密度均显示,特异性人PCNA组与其对照组比较有统计学差异(P<0