目的:使用RNA干扰技术阻断人结肠癌细胞cyclin D1的表达,检测其对细胞生长增殖的影响和机制.方法:将人结肠癌细胞株HT-29分成3组,antisense组(转染反义链组)、sense组(转染正义链组)和对照组.免疫沉淀和蛋白质印迹法观察cyclin D1 siRNA对细胞cyclin D1蛋白质表达的影响,并对蛋白质电泳图像进行分析,MTT比色法绘制细胞生长曲线,3H-TdR技术和流式细胞技术观测细胞周期变化.结果:反义siRNA有效抑制了cyclin D1蛋白质表达,MTT实验显示,转染反义siRNA的细胞,生长代谢减慢,与对照组细胞差异显著(P＜0.01).而antisense组细胞24 h的3H-TdR渗入量,G0/G1期和S期细胞较对照组和sense组明显减少(3H-TdR:1181.8±117.97 vs 1798.4±55.36,1851.4±83.46;P＜0.01;G0/G1期:79.31
作者：丁健；李丹；王承党；吴婷；王小众；于皆平
来源：世界华人消化杂志 2007 年 15卷 34期
