目的 探讨钙超载在Aβ25-35引起HT22细胞Per2表达变化中的作用.方法 体内研究将C57BL/6小鼠双侧海马注射Aβ25-35(300 μmol/kg)和无菌水后,利用跑轮行为学实验评估小鼠的昼夜节律.体外研究将HT22细胞分为对照组、Aβ25-35处理组、Nim+ Aβ25-35处理组.以MTT法检测细胞存活率,实时荧光定量PCR检测per2 mRNA表达水平,Western Blotting检测PER2蛋白相对表达量,免疫荧光染色观察PER2蛋白原位表达情况,流式细胞术检测胞内钙离子浓度.结果 体内研究表明Aβ25-35导致C57BL/6小鼠在跑轮行为学实验中表现出明显的昼夜节律紊乱.离体研究发现,5、10、15、20、25、30 μmol/L Aβ25-35剂量组细胞存活率较对照组显著降低(P<0.05).经20 μmol/L Aβ25-35处理后,per2 mRNA及PER2蛋白水平在CT16较对照组显著降低(P<0.05).经钙离子拮抗剂尼莫地平预处理后,由Aβ25-35在CT16所致per2 mRNA及PER2蛋白水平的降低均显著升高(P<0.05).结论 钙超载在Aβ25-35引起HT22细胞Per2异常表达中发挥重要作用.
作者:李亚蒙;赵学玲;任亚楠;张蕊;赵今;原媛;王丽;王晓晖
来源:航天医学与医学工程 2017 年 30卷 6期