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目的:探讨强噪声对豚鼠耳蜗细胞死亡的机制及CHOP/Gadd153在强噪声诱导耳蜗细胞凋亡中的作用.方法:选用健康雄性白色豚鼠32只,将实验组豚鼠暴露在4 kHz窄带噪声120 dB SPL噪声环境中4 h,噪声刺激停止后1,4,14 d组(实验组)及对照组(每组各8只)在处死前测听性脑干反应(ABR).取每组4只豚鼠耳蜗作石蜡切片,另外4只豚鼠提取耳蜗总蛋白.脱氧核糖核甘酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术(TUNEL)检测耳蜗凋亡细胞,免疫组织化学及western blot方法检测CHOP/Gadd153、Bcl-2蛋白的表达.结果:实验组耳蜗Corti's器、血管纹和螺旋神经节细胞(SGC)存在TUNEL阳性细胞,以1 d组最多,而对照组未见阳性细胞.免疫组化、western Blot检测,实验组CHOP/Gadd153表达明显高于对照组(P<0.01),各实验组CHOP/Gadd153表达没有差异(P>0.05);免疫组织化学观察到实验组CHOP/Gadd153在Corti's器、螺旋神经节及侧壁有免疫反应阳性,定位于胞核,对照组表达阴性.Westerr Blot检测实验组Bcl-2蛋白无表达,而对照组Bcl-2的表达明显高于实验组(P<0.01);对照组Corti's器、螺旋神经节及侧壁的细胞质上有染色程度不等的棕黄色颗粒分布,实验组表达阴性.结论:强噪声可以通过上调CHOP/Gadd153蛋白,进而下调Bcl-2蛋白的表达来诱导豚鼠耳蜗细胞凋亡.

作者:薛秋红;陈佳;龚树生;谢静;何坚;陈小林

来源:武汉大学学报(医学版) 2011 年 32卷 2期

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作者:
薛秋红;陈佳;龚树生;谢静;何坚;陈小林
来源:
武汉大学学报(医学版) 2011 年 32卷 2期
标签:
强噪声 凋亡 耳蜗 CHOP/Gadd153 Bcl-2
目的:探讨强噪声对豚鼠耳蜗细胞死亡的机制及CHOP/Gadd153在强噪声诱导耳蜗细胞凋亡中的作用.方法:选用健康雄性白色豚鼠32只,将实验组豚鼠暴露在4 kHz窄带噪声120 dB SPL噪声环境中4 h,噪声刺激停止后1,4,14 d组(实验组)及对照组(每组各8只)在处死前测听性脑干反应(ABR).取每组4只豚鼠耳蜗作石蜡切片,另外4只豚鼠提取耳蜗总蛋白.脱氧核糖核甘酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术(TUNEL)检测耳蜗凋亡细胞,免疫组织化学及western blot方法检测CHOP/Gadd153、Bcl-2蛋白的表达.结果:实验组耳蜗Corti's器、血管纹和螺旋神经节细胞(SGC)存在TUNEL阳性细胞,以1 d组最多,而对照组未见阳性细胞.免疫组化、western Blot检测,实验组CHOP/Gadd153表达明显高于对照组(P<0.01),各实验组CHOP/Gadd153表达没有差异(P>0.05);免疫组织化学观察到实验组CHOP/Gadd153在Corti's器、螺旋神经节及侧壁有免疫反应阳性,定位于胞核,对照组表达阴性.Westerr Blot检测实验组Bcl-2蛋白无表达,而对照组Bcl-2的表达明显高于实验组(P<0.01);对照组Corti's器、螺旋神经节及侧壁的细胞质上有染色程度不等的棕黄色颗粒分布,实验组表达阴性.结论:强噪声可以通过上调CHOP/Gadd153蛋白,进而下调Bcl-2蛋白的表达来诱导豚鼠耳蜗细胞凋亡.