目的:探讨自行构建pcDNA4-PDGF-B重组质粒并转染兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)的方法及可行性,并观察转染阳性细胞形态及生物特性.方法:构建包含人类血小板源性生长因子B(PDGF-B)重组质粒,将目的基因转染到兔BMSCs中,并通过形态观察、双酶切、聚合酶链反应、免疫组化来检测该目的基因在兔BMSCs中表达,通过G418抗生素筛选、MTT法绘制细胞生长曲线探讨PDGF-B基因对靶细胞生长影响.结果:pcDNA4-PDGF-B重组质粒的构建合成及人PDFG-B基因成功转染BMSCs,并持续稳定地表述PDGF B.结论:PDGF-B基因可以对骨髓间充干细胞进行转染,PDGF-B对靶细胞增殖、分裂有明显促进作用,为后期研究植入人PDGF-B转染BMSCs以缓解急性肝功能衰竭奠定了基础.
作者:龙清云;赵松;祝新平;周军;张一帆;张晓龙
来源:武汉大学学报(医学版) 2013 年 34卷 1期