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目的 脂质体介导IGF-1目的基因转染骨髓间充质干细胞(MSCS),并研究对MSCS成软骨分化的特异性细胞外基质的影响.方法 以密度梯度离心结合全骨髓培养法获得纯化骨髓间充质干细胞(MSCS),经流式细胞仪检测,细胞表面标志CD29和CD44表达阳性,但是CD14和CD45表达阴性.采用脂质体介导法将重组真核表达质粒pcDNA3.1-IGF-1转染MSCs,对转染后骨髓间充质干细胞的Ⅱ型胶原(ColⅡ)的表达行Western blot检测.结果 获得纯度较高的兔骨髓间充质干细胞(MSCS);脂质体为介导将全长兔IGF-1目的基因导入MSCs.Western blot鉴定转染成功,转染后的MSCs较未转染MSCs成软骨分化特异性细胞外基质Col Ⅱ、蛋白表达明显增强.结论 以脂质体介导法可以将IGF-1目的基因转染骨髓间充质干细胞,转染后成软骨分化的特异性细胞外基质增多.

作者:付勤;宫树一;杨礼庆;贾长青

来源:中国现代医学杂志 2008 年 18卷 6期

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作者:
付勤;宫树一;杨礼庆;贾长青
来源:
中国现代医学杂志 2008 年 18卷 6期
标签:
骨髓间充质干细胞 基因转染 细胞外基质
目的 脂质体介导IGF-1目的基因转染骨髓间充质干细胞(MSCS),并研究对MSCS成软骨分化的特异性细胞外基质的影响.方法 以密度梯度离心结合全骨髓培养法获得纯化骨髓间充质干细胞(MSCS),经流式细胞仪检测,细胞表面标志CD29和CD44表达阳性,但是CD14和CD45表达阴性.采用脂质体介导法将重组真核表达质粒pcDNA3.1-IGF-1转染MSCs,对转染后骨髓间充质干细胞的Ⅱ型胶原(ColⅡ)的表达行Western blot检测.结果 获得纯度较高的兔骨髓间充质干细胞(MSCS);脂质体为介导将全长兔IGF-1目的基因导入MSCs.Western blot鉴定转染成功,转染后的MSCs较未转染MSCs成软骨分化特异性细胞外基质Col Ⅱ、蛋白表达明显增强.结论 以脂质体介导法可以将IGF-1目的基因转染骨髓间充质干细胞,转染后成软骨分化的特异性细胞外基质增多.