目的:观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)反义寡核苷酸(AODN)对大鼠肺成纤维细胞增殖、转化信号通路的影响.方法:分离成年大鼠肺成纤维细胞,分为4组:对照组(未转染肺成纤维细胞);TGF-β1组(未转染肺成纤维细胞+5 ng/ml TGF-β1刺激);TGF-β1+AODN组(转染AODN肺成纤维细胞+5 ng/ml TGF β1刺激);TGF-β1+RODN(正义寡核苷酸)组(转染RODN肺成纤维细胞+5 ng/ml TGF-β1刺激).每组设3复孔,并作细胞爬片,镜下计数肺成纤维细胞数量,绘制生长曲线.MTT比色法测定肺成纤维细胞增殖率.免疫细胞化学方法检测肌成纤维细胞特异性标志物α平滑肌肌动蛋白(α-SMA).通过ELISA法检测培养液中bFGF、CTGF及Ⅰ型胶原蛋白含量.用RT-PCR法分析肺成纤维细胞Smad3 mRNA、Smad7 mRNA、Ⅰ型胶原mRNA表达水平.结果:①细胞计数显示:TGF β1+RODN组各时段成纤维细胞的数目均较对照组、TGF-β1组、TGFβ1+AODN组明显增多(P＜0.05);TGF β1+AODN组中成纤维细胞增殖数比TGFβ1组明显减低(P＜0.05).②MTT结果显示:TGF-β1+RODN组肺成纤维细胞光密度值明显高于对照组、TGF-β1组、TGF-β1+AODN组(P＜0.05);TGF-β1+ AODN组中肺成纤维细胞光密度值明显比TGFβ1组减低(P＜0.05).③免疫细胞化学染色结果显示:TGF-β1+ RODN组肺成纤维细胞与对照组

作者：谭秋月；程真顺；谭维军；叶燕青；张莉

来源：武汉大学学报（医学版） 2015 年 36卷 2期