目的:探讨缺氧条件下miR-145对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖、迁移及凋亡的影响及可能作用机制.方法:采用组织贴壁方法培养获得兔原代VSMC.用脂质体转染法将miR-145 mimics转入VSMC细胞.实验设置为常氧条件下(21%O2,5%CO2,74%N2)空白对照组、miR-NC组、miR-145 mimic组、miR-145 inhibitor组;缺氧条件下(3%O2,5%CO2,92%N2)空白对照组,miR-NC组,miR-145 mimic组,miR-145 inhibitor组.应用real timePCR检测miR-145在各组细胞表达水平.采用EdU染色检测VSMC增殖能力,Transwell实验检测VSMC细胞迁移能力,流式细胞仪检测细胞凋亡.采用targetScan,miRanda和PicTar靶基因预测软件和DAVID数据库对miR-145进行生物信息学分析,预测可能的靶基因.结果:在常氧与缺氧条件下,与miR-NC组相比,转染miR-145mimic组增殖率和迁移率明显减少,细胞凋亡率增高(P<o.05);转染miR-145 inhibitor组增殖率和迁移率明显增加,细胞凋亡率下降(P<o.05).同时与常氧条件相比,缺氧组增殖率和迁移率明显增加以及细胞凋亡率下降(P<0.05).生物信息学分析提示miR-145靶基因的通路信号富集主要为促分裂素原活化蛋白激酶1(MAPK1),细胞周期蛋白依赖性激酶6 (CDK6),钙/钙调素依赖蛋白激酶2D(Ca2+/CAMK2D)信号通路等.结论:缺氧条件下,在VSMC细胞
作者:丁氏兰瑛;曹晔萱;赵旻;方奇;李凯勇;徐战战;周煜;石芳;万静
来源:武汉大学学报(医学版) 2017 年 38卷 2期