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目的:研究胞外基质(ECM)材料木糖葡聚糖(XG)对人肝癌细胞系HepG2细胞在细胞培养板上的贴壁性及对微囊化HepG2细胞的清蛋白合成速率、NH+清除速率、细胞增殖速率和间隙连接蛋白(Cx32)、细胞黏附分子(E-cadherin)表达的影响.方法:将HepG2细胞接种于不同浓度XG(0,0.5,1,4,6 mg/ml)包被的细胞培养板上,孵育4h后收集贴壁细胞,BCA法测贴壁细胞总蛋白量进而测定细胞贴壁率;利用自制装置制备包被HepG细胞的海藻酸-多聚赖氨酸-海藻酸(APA)微囊并在培养微囊第6,10,14天以Human Serum Albumin Elisa Kit、Am-monia Assay Kit分别测定培养液中人血清白蛋白(HSA)和处理溶液中NH4+的浓度,检测微囊化HepG2细胞的清蛋白合成速率和NH+清除速率;微囊培养1,2,3d后裂解微囊收集HepG2细胞并以RT-PCR方法检测细胞内Cx32和E-cadherin的表达情况.结果:HepG2细胞在XG包被的细胞培养板上的贴壁率随XG浓度增大呈递增趋势,同时微囊内细胞数随XG浓度增大、培养时间延长而增加,说明XG可促进细胞/基质间相互作用,促进细胞生长增殖;微囊化HepG2细胞的清蛋白合成速率与NH+清除速率在XG浓度为1 mg/ml时达到最大且较空白组高,说明XG对细胞合成及代谢功能有一定促进作用;加入XG的微囊内细胞表达Cx32、E-cadherin的时间较空白组提前,说明XG的存

作者:陆胜利;祁超

来源:武汉大学学报(医学版) 2017 年 38卷 4期

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作者:
陆胜利;祁超
来源:
武汉大学学报(医学版) 2017 年 38卷 4期
标签:
肝组织工程 木糖葡聚糖 海藻酸 微囊化 Liver Tissue Engineering Xylogulcan Alginate Encapsulation
目的:研究胞外基质(ECM)材料木糖葡聚糖(XG)对人肝癌细胞系HepG2细胞在细胞培养板上的贴壁性及对微囊化HepG2细胞的清蛋白合成速率、NH+清除速率、细胞增殖速率和间隙连接蛋白(Cx32)、细胞黏附分子(E-cadherin)表达的影响.方法:将HepG2细胞接种于不同浓度XG(0,0.5,1,4,6 mg/ml)包被的细胞培养板上,孵育4h后收集贴壁细胞,BCA法测贴壁细胞总蛋白量进而测定细胞贴壁率;利用自制装置制备包被HepG细胞的海藻酸-多聚赖氨酸-海藻酸(APA)微囊并在培养微囊第6,10,14天以Human Serum Albumin Elisa Kit、Am-monia Assay Kit分别测定培养液中人血清白蛋白(HSA)和处理溶液中NH4+的浓度,检测微囊化HepG2细胞的清蛋白合成速率和NH+清除速率;微囊培养1,2,3d后裂解微囊收集HepG2细胞并以RT-PCR方法检测细胞内Cx32和E-cadherin的表达情况.结果:HepG2细胞在XG包被的细胞培养板上的贴壁率随XG浓度增大呈递增趋势,同时微囊内细胞数随XG浓度增大、培养时间延长而增加,说明XG可促进细胞/基质间相互作用,促进细胞生长增殖;微囊化HepG2细胞的清蛋白合成速率与NH+清除速率在XG浓度为1 mg/ml时达到最大且较空白组高,说明XG对细胞合成及代谢功能有一定促进作用;加入XG的微囊内细胞表达Cx32、E-cadherin的时间较空白组提前,说明XG的存