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目的:探讨视网膜小胶质细胞通过P2X7-NLRP3/caspase-1炎症小体通路介导的在脉络膜新生血管(CNV)发生中的作用机制.方法:40只C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组和CNV激光模型组.实验各组于激光照射后第4天取材,应用眼底荧光素血管造影(FFA)和光相干断层扫描(OCT)一体机观察激光照射处CNV是否形成;应用免疫荧光检测视网膜冰冻切片P2X7和NLRP3/Caspase-1炎症小体和IL-1β的表达情况;分别运用Western Blot和实时荧光定量PCR检测CD11b、P2X7、NLRP3炎症小体、caspase-1和IL-1β蛋白含量表达和mRNA含量的表达情况.结果:FFA检查显示,CNV模型组激光斑处早期呈现强荧光改变,晚期荧光素渗漏增强,表明CNV生成;正常对照组无明显荧光素渗漏.视网膜组织免疫荧光显示,激光斑处小胶质细胞胞体增大,呈阿米巴状;激光诱导损伤的第4天,激光斑处可见P2X7、NLRP3炎症小体、caspase-1和IL-1β抗体所标记的阳性细胞聚集.与正常对照组相比,应用Western Blot和实时荧光定量PCR所检测激光诱发CNV模型组CD11b、P2X7、NLRP3炎症小体、Caspase-1和IL-1β的蛋白含量和mRNA含量均明显上升(P<0.05).结论:初步揭示了在CNV发生过程中,视网膜小胶质细胞通过P2X7-NLRP3/easpase-1炎症小体通路的作用机制.

作者:许阿敏;李璐;陈长征;易佐慧子;王晓玲;刘珏君

来源:武汉大学学报(医学版) 2020 年 41卷 4期

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作者:
许阿敏;李璐;陈长征;易佐慧子;王晓玲;刘珏君
来源:
武汉大学学报(医学版) 2020 年 41卷 4期
标签:
脉络膜新生血管 小胶质细胞 P2X7 NLRP3 Caspase-1
目的:探讨视网膜小胶质细胞通过P2X7-NLRP3/caspase-1炎症小体通路介导的在脉络膜新生血管(CNV)发生中的作用机制.方法:40只C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组和CNV激光模型组.实验各组于激光照射后第4天取材,应用眼底荧光素血管造影(FFA)和光相干断层扫描(OCT)一体机观察激光照射处CNV是否形成;应用免疫荧光检测视网膜冰冻切片P2X7和NLRP3/Caspase-1炎症小体和IL-1β的表达情况;分别运用Western Blot和实时荧光定量PCR检测CD11b、P2X7、NLRP3炎症小体、caspase-1和IL-1β蛋白含量表达和mRNA含量的表达情况.结果:FFA检查显示,CNV模型组激光斑处早期呈现强荧光改变,晚期荧光素渗漏增强,表明CNV生成;正常对照组无明显荧光素渗漏.视网膜组织免疫荧光显示,激光斑处小胶质细胞胞体增大,呈阿米巴状;激光诱导损伤的第4天,激光斑处可见P2X7、NLRP3炎症小体、caspase-1和IL-1β抗体所标记的阳性细胞聚集.与正常对照组相比,应用Western Blot和实时荧光定量PCR所检测激光诱发CNV模型组CD11b、P2X7、NLRP3炎症小体、Caspase-1和IL-1β的蛋白含量和mRNA含量均明显上升(P<0.05).结论:初步揭示了在CNV发生过程中,视网膜小胶质细胞通过P2X7-NLRP3/easpase-1炎症小体通路的作用机制.