目的 利用稳定表达凋亡相关斑点样蛋白(ASC)的小鼠巨噬细胞系(RAW-ASC)构建巨噬细胞焦亡体外模型,深入探讨不同粒径二氧化硅(SiO2)粉尘诱导核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体依赖的巨噬细胞焦亡机制及其在矽肺发病中的潜在作用.方法 以脂多糖(LPS,1 μg/ml)预处理RAW-ASC巨噬细胞6h,纳米(100μg/ml)或微米(750 μg/ml)SiO2粉尘暴露4 h,构建巨噬细胞焦亡体外模型,同时匹配空白对照组、LPS预处理组和焦亡阳性对照组(1 μg/ml LPS预处理6 h后,3 mmol/L ATP处理4 h),检测各组细胞活性、增殖能力、破裂状况和焦亡相关蛋白表达情况.针对离子通道和焦亡通路相关靶点,分别加入NLRP3抑制剂和嘌呤能P2X7受体(P2X7)拮抗剂,评估SiO2诱发焦亡改变.结果 与对照组相比,纳米和微米SiO2粉尘均可减弱巨噬细胞活力并抑制细胞增殖,还可促进细胞裂解,使细胞外乳酸脱氢酶(LDH)(纳米组:t=78.906,P＜0.001;微米组:t=8.123,P＜0.001)、细胞内活性氧(ROS)(纳米组:t=5.662,P＜0.001;微米组:t=11.761,P＜0.001)和钙离子(Ca2+)(纳米组:t=13.224,P＜0.001;微米组:t=40.733,P＜0.001)水平升高,加速ATP耗竭(纳米组:t=4.898,P＜0.001;微米组:t=6.029,P＜0.001),上调焦亡相关蛋白NLRP3、ASC、半胱天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-

作者：田家齐；马兰；韩正朴；殷浩宇；彭延杰；张敬；李炜修；张美华；张林

来源：现代预防医学 2022 年 49卷 9期