目的:探讨褪黑素对过氧化氢(H
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2)诱导的人晶状体上皮细胞(HLECs)焦亡的影响及其机制。
方法:取传代培养的HLECs分为5个组,其中正常对照组常规培养,模型对照组于100 μmol/L H
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2条件下培养,褪黑素组、维生素E组和维生素E溶剂组分别用1×10
-6 mol/L褪黑素、100 μmol/L维生素E和维生素E溶剂预处理后,用100 μmol/L H
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2继续培养,收集细胞待检测。为进一步探讨褪黑素的作用机制,将细胞分为7个组,其中正常对照组常规培养;模型对照组细胞于100 μmol/L H
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2条件下培养;核转录因子E2相关因子2短发夹RNA(shNrf2)阴性对照组和shNrf2组细胞分别用shNrf2阴性对照和shNrf2慢病毒转染,并于终浓度100 μmol/L H
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2条件下培养;褪黑素组细胞在终浓度1×10
-6 mol/L褪黑素条件下培养,然后加入终浓度100 μmol/L H
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2继续培养;褪黑素+shNrf2阴性对照组和褪黑素+shNrf2组细胞首先分别采用shNrf2阴性对照或shNrf2慢病毒转染,再于终浓度1×10
-6 mol/L褪黑素和终浓度100 μmol/L H
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2条件下培养,收集各组细胞。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组细胞培养上清液中乳酸脱氢
作者:杨鑫;刘旭辉;孟佳;方梦园;张凤妍
来源:中华实验眼科杂志 2022 年 40卷 5期