目的探讨重组人α-干扰素(rhIFN-α)联合重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)体外诱导培养脐血树突状细胞(DCs)的实验方法.方法人脐血贴壁单个核细胞加入rhIFN-α及rhGM-CSF诱导培养,镜下观察培养细胞形态;流式细胞术检测培养细胞CD83、CD86的表达;MTT法检测诱导培养的DCs体外刺激同种异体T淋巴细胞增殖的活性.结果人脐血贴壁单个核细胞经rhIFN-α联合rhGM-CSF共同培养后,第7 d镜下可见有表面呈树状突起的DCs;细胞免疫表型检测结果示培养细胞有成熟DCs特异性标记CD83及共刺激分子CD86表达;rhIFN-α为600 U/ml、rhGM-CSF为2000 U/ml时为脐血DCs诱导培养的合适浓度(培养细胞CD83+CD86+细胞比率最高);以诱导培养7 d的脐血细胞(含DCs)作为刺激细胞与同种异体T淋巴细胞(反应细胞)以不同比例混合培养时,DCs均可刺激其增殖,其中以反应细胞∶刺激细胞为20∶1时最明显.结论 rhIFN-α联合rhGM-CSF细胞因子体外诱导人脐血贴壁单个核细胞,可生成具有典型形态及功能的成熟DCs.
作者:洪冬玲;李强;贾苍松
来源:四川大学学报(医学版) 2004 年 35卷 5期