目的 建立稳定沉默髓样分化因子88基因(MyD88)的大鼠胰腺导管细胞株ARIP.方法 设计并构建编码MyD88 mRNA的短发卡样RNA(shRNA)质粒表达载体,并用三质粒包装系统包装成慢病毒,分别命名为Lenti-shMyD88-1和Lenti-shMyD88-2.将ARIP分为未处理组、Lenti-Non Target阴性对照组、Lenti-shMyD88-1组和Lenti-shMyD88-2组.并用相应的病毒转导(未处理组只换液).经流式分选和抗生素筛选结合的方法筛选绿色荧光蛋白阳性细胞,测定细胞的转导效率并用real-time PCR方法测定沉默效率.结果 成功构建了编码表达MyD88的shRNA表达质粒.经流式分选和抗生素筛选后,慢病毒转导效率均达到100
作者:李扬;周斌;陈珂玲;刘勇;詹兰;李园;周总光
来源:四川大学学报(医学版) 2011 年 42卷 3期