目的 研究细胞自噬在三氧化二砷(ATO)诱导的肝癌细胞死亡中的作用,观察调控细胞自噬对ATO诱导的细胞凋亡有何影响.方法 以人肝癌HepG2细胞为研究对象,在ATO作用于HepG2细胞的基础上,加入自噬激动剂[雷帕霉素(Rap)]和自噬抑制剂[三甲基腺嘌呤(3-MA)]进行调控.以MTT法检测细胞生存率,透射电镜观察自噬体结构,免疫印迹法分析自噬相关蛋白LC-3和Beclinl的表达;流式细胞术检测细胞凋亡.结果 5～20 μmol/L ATO与10 mmol/L 3-MA联用时HepG2细胞存活率比同剂量ATO单独作用时降低(P＜0.05),凋亡率增加(P＜0.05),细胞内呈现典型凋亡反应特征,自噬蛋白LC3和Beclinl表达低于ATO单独作用组(P＜0.05).相反,5～20 μmol/L ATO与o.25 μmol/L Rap联用时,HepG2细胞的存活率比ATO单独作用时显著增加(P＜0.05),凋亡率降低(P＜0.05),细胞内出现大量自噬体结构,自噬蛋白LC3和Beclinl的表达较ATO单独作用组有增加趋势,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 特异性自噬抑制剂能显著增强ATO杀伤肝癌细胞的敏感性,其机制与增强肝癌细胞凋亡有关.
作者：李洋；谷仕艳；张遵真
来源：四川大学学报（医学版） 2017 年 48卷 2期
