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目的 从工业三七药渣中提取、分离及纯化三七多糖,测定三七粗多糖及三七多糖洗脱组分的含量、分子量和pH,并考察其对人牙周膜干细胞、小鼠成骨细胞体外增殖活性的影响.方法 以提取过三七总皂苷的工业三七药渣为原料,采用水提醇沉法得到三七粗多糖,通过DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析柱分离纯化三七粗多糖;采用蒽酮-硫酸法测定三七粗多糖及三七多糖洗脱组分的含量,用高效凝胶渗透色谱法测定其分子量;采用MTT法测定三七粗多糖及三七多糖洗脱组分对人牙周膜干细胞、小鼠成骨细胞体外增殖活性的影响.结果 水提醇沉法得到三七粗多糖的含量为69.7%,得率2.43%;通过DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析柱分离纯化三七粗多糖,得到水洗脱部分PNPS Ⅰ及NaCl溶液梯度洗脱部分PNPSⅡ~Ⅴ;三七粗多糖、PNPS Ⅰ~Ⅴ重均分子量分别为38.59、32.00、96.98、148.60、154.40、113.60 kDa;在一定浓度范围内,三七粗多糖、PNPS Ⅰ~Ⅱ能促进人牙周膜干细胞的生长,PNPSⅢ~Ⅳ能抑制其生长;三七粗多糖、PNPS Ⅰ~Ⅳ具促进小鼠成骨细胞生长的作用.结论 通过DEAE Sepharose FastFlow阴离子交换层析柱分离纯化三七粗多糖,得到1种中性多糖和4种酸性多糖;三七粗多糖、PNPS Ⅰ~Ⅱ能促进人牙周膜干细胞的体外增殖,三七粗

作者:李怀宇;钟媛媛;李双;孙孔春;张晓红;姚艳云;刘艳红;侯世祥;陈彤

来源:华西药学杂志 2019 年 34卷 5期

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李怀宇;钟媛媛;李双;孙孔春;张晓红;姚艳云;刘艳红;侯世祥;陈彤
来源:
华西药学杂志 2019 年 34卷 5期
标签:
三七多糖 DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换树脂 分离纯化 人牙周膜干细胞 小鼠成骨细胞MC3T3-E1 体外增殖活性 MTT法 碱性磷酸酶 骨钙素
目的 从工业三七药渣中提取、分离及纯化三七多糖,测定三七粗多糖及三七多糖洗脱组分的含量、分子量和pH,并考察其对人牙周膜干细胞、小鼠成骨细胞体外增殖活性的影响.方法 以提取过三七总皂苷的工业三七药渣为原料,采用水提醇沉法得到三七粗多糖,通过DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析柱分离纯化三七粗多糖;采用蒽酮-硫酸法测定三七粗多糖及三七多糖洗脱组分的含量,用高效凝胶渗透色谱法测定其分子量;采用MTT法测定三七粗多糖及三七多糖洗脱组分对人牙周膜干细胞、小鼠成骨细胞体外增殖活性的影响.结果 水提醇沉法得到三七粗多糖的含量为69.7%,得率2.43%;通过DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析柱分离纯化三七粗多糖,得到水洗脱部分PNPS Ⅰ及NaCl溶液梯度洗脱部分PNPSⅡ~Ⅴ;三七粗多糖、PNPS Ⅰ~Ⅴ重均分子量分别为38.59、32.00、96.98、148.60、154.40、113.60 kDa;在一定浓度范围内,三七粗多糖、PNPS Ⅰ~Ⅱ能促进人牙周膜干细胞的生长,PNPSⅢ~Ⅳ能抑制其生长;三七粗多糖、PNPS Ⅰ~Ⅳ具促进小鼠成骨细胞生长的作用.结论 通过DEAE Sepharose FastFlow阴离子交换层析柱分离纯化三七粗多糖,得到1种中性多糖和4种酸性多糖;三七粗多糖、PNPS Ⅰ~Ⅱ能促进人牙周膜干细胞的体外增殖,三七粗