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利用PCR技术扩增出人体转铜伴侣蛋白Atox1的cDNA片段,直接克隆到PCRII载体上,经DNA序列测定后,再插入到谷胱甘肽巯基转移酶(GST)融合表达载体PGEX-6p-2上,构成重组表达质粒PGEA,将此质粒导入大肠杆菌,经IPTG诱导后获得PGEA融合蛋白的表达.表达的融合蛋白经亲和层析、位点特异性蛋白酶切得到纯化的Atox1蛋白.
作者:张雪峰;高旭;尹王申;周虹
来源:基础医学与临床 2001 年 21卷 5期
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