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目的:体外表达人源性MT-1E融合蛋白并进行纯化.方法:采用RT-PCR方法获得人MT-1E基因的编码区,将其克隆入原核表达载体pQE40,并在大肠杆菌M15中表达,对蛋白的表达形式及诱导条件进行分析,用Ni-NT agarose亲和层析柱纯化目的蛋白.结果:重组蛋白在原核细胞中以可溶和不可溶两种表达形式存在,但以不可溶性形式为主,表达量随诱导时间延长而增加,在诱导8 h时目的蛋白约占菌体总蛋白的32

作者:杨芳;贺智敏;孙颖;陈主初;严斌;黄宏科;李廷宝

来源:湖南医科大学学报 2003 年 28卷 6期

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作者:
杨芳;贺智敏;孙颖;陈主初;严斌;黄宏科;李廷宝
来源:
湖南医科大学学报 2003 年 28卷 6期
标签:
金属硫蛋白 原核融合表达载体 重组融合蛋白 亲和层析
目的:体外表达人源性MT-1E融合蛋白并进行纯化.方法:采用RT-PCR方法获得人MT-1E基因的编码区,将其克隆入原核表达载体pQE40,并在大肠杆菌M15中表达,对蛋白的表达形式及诱导条件进行分析,用Ni-NT agarose亲和层析柱纯化目的蛋白.结果:重组蛋白在原核细胞中以可溶和不可溶两种表达形式存在,但以不可溶性形式为主,表达量随诱导时间延长而增加,在诱导8 h时目的蛋白约占菌体总蛋白的32