目的 探索pTAT-XIAP融合表达载体的构建方法.方法 在体外合成大鼠XIAP基因,将其插入pTAT-HA质粒,构建pTAT-HA/XIAP融合表达载体,将pTAT-HA/XIAP质粒转化至DH5α感受态细胞, 筛选培养转化成功的单克隆,NcoI/XhoI双酶切后琼脂糖电泳鉴定.结果 转化pTAT-HA/XIAP质粒的DH5α在含氨苄青霉素的LB固体培养基上呈分散菌落生长.电泳结果显示重组pTAT-HA/XIAP质粒约4 500 bp,酶切后可观察到PTAT-HA质粒约3 000 bp,XIAP目的 基因条带1 494 bp,pTAT空质粒约3 000 bp,条带大小与质粒图谱一致.结论 将大鼠XIAP基因成功插入pTAT-HA质粒,构建pTAT-XIAP融合蛋白表达载体,提取的质粒可用于下游分子生物学实验.
作者：蒋常文；夏春波；徐雅娟；阳秋娣；刘源劼；周思
来源：中国老年学杂志 2010 年 30卷 8期
