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目的 明确C-JUN氨基末端激酶(JNK)信号通路在高糖诱导大鼠心肌成纤维细胞增殖中的作用.方法 提取大鼠原代心肌成纤维细胞,观察不同糖浓度(12、18和25 mmol/L葡萄糖)和不同刺激时间(0、12、24和48 h)对JNK通路的影响.实验分为对照组(5.5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(25 mmol/L葡萄糖)、JNK抑制剂SP600125组(25 mmol/L葡萄糖+SP600125 10、20μmol/L)和高渗组(5.5 mmol/L葡萄糖+19.5 mmol/L甘露醇)培养48 h,应用MTT测定细胞增殖、Weastern blot测定JNK磷酸化水平和增殖细胞核抗原(PCNA)的蛋白表达、RT-PCR检测C-JUN基因表达.结果 高糖呈时间和剂量依赖性增加JNK磷酸化水平.与对照组比较,高糖显著地促进了心肌成纤维细胞的增殖(0.44±0.02 vs 0.31±0.02,P<0.01),并上调了C-JUN的基因表达和PCNA蛋白水平.SP600125能够浓度依赖性地抑制高糖诱导的细胞增殖和JNK通路的激活.结论 JNK信号通路部分地介导了高糖诱导的大鼠心肌成纤维细胞增殖.

作者:刘丽华;房彩霞;邓永贵;周红

来源:基础医学与临床 2013 年 33卷 2期

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作者:
刘丽华;房彩霞;邓永贵;周红
来源:
基础医学与临床 2013 年 33卷 2期
标签:
葡萄糖 心肌成纤维细胞 增殖 C-JUN氨基末端激酶
目的 明确C-JUN氨基末端激酶(JNK)信号通路在高糖诱导大鼠心肌成纤维细胞增殖中的作用.方法 提取大鼠原代心肌成纤维细胞,观察不同糖浓度(12、18和25 mmol/L葡萄糖)和不同刺激时间(0、12、24和48 h)对JNK通路的影响.实验分为对照组(5.5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(25 mmol/L葡萄糖)、JNK抑制剂SP600125组(25 mmol/L葡萄糖+SP600125 10、20μmol/L)和高渗组(5.5 mmol/L葡萄糖+19.5 mmol/L甘露醇)培养48 h,应用MTT测定细胞增殖、Weastern blot测定JNK磷酸化水平和增殖细胞核抗原(PCNA)的蛋白表达、RT-PCR检测C-JUN基因表达.结果 高糖呈时间和剂量依赖性增加JNK磷酸化水平.与对照组比较,高糖显著地促进了心肌成纤维细胞的增殖(0.44±0.02 vs 0.31±0.02,P<0.01),并上调了C-JUN的基因表达和PCNA蛋白水平.SP600125能够浓度依赖性地抑制高糖诱导的细胞增殖和JNK通路的激活.结论 JNK信号通路部分地介导了高糖诱导的大鼠心肌成纤维细胞增殖.